人抗胰蛋白酶elisa試劑盒實驗原理是用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的MT抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物(TMB)顯色。
可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:
1、固相的抗菌素原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);
2、酶標記的抗原或抗體,稱為"結合物"(conjugate);
3、酶反應的底物。
試劑準備:
1、使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2、標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,依次倍比稀釋成不同的梯度,標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
3、濃洗滌液:用580mL蒸餾水或去離子水將20mL濃洗滌液稀釋至600mL,進行30倍稀釋。
人抗胰蛋白酶elisa試劑盒的保溫:
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體結合的合適溫度??乖贵w反應4℃更為*,在免疫測定中多使反應在冰箱中夜,以形成多的沉淀。